外泌体提取

外泌体是直径介于30-150nm的膜性小囊泡。有关外泌体的分离，不同的提取方法各有利弊，不同方法的选择取决于下游的应用及需要解决的科学问题。国际囊泡协会（ISEV）在“2018年囊泡研究基本实验要求（MISEV2018）”中把含外泌体的分离方法分为以下4个层面：（1）高回收率，低特异性：沉淀法、低分子量过滤；（2）中等回收率，中等特异性：超速离心、排阻色谱、高分子量过滤、膜亲和柱；（3）低回收率，高特异性：排阻+超滤、免疫捕获、流式细胞术；（4）高回收率，高特异性：目前不存在，未来可能会有。

翌科生物根据客户需求，可提供涵盖上述所有方法的外泌体提取服务

外泌体鉴定

外泌体染色示踪

PKH26染色后外泌体与细胞共培

PKH67染色后外泌体与细胞共培

组织外泌体分离

从组织间隙中分离出的外泌体，具有真实性、排他性、丰富性和创造性特征。组织外泌体主要进行肿瘤、脑部疾病、衰老和免疫相关的研究，紧跟国际前沿，且具有重要临床意义。

脑组织外泌体分离实例

采用消化+超离法从脑组织中分离外泌体：将脑组织剪成薄片，放入离心管中加上消化液进行消化，经水浴、反复轻轻上下颠倒，再用移液枪间断缓慢吹吸至消化结束。随后加入培养基于消化液中，混匀，置于冰上。再进行一系列的差速超速离心过程，包括除杂、滤膜过滤、超离等。最后用PBS重悬外泌体，用重悬后的外泌体进行下面的透射电镜（TEM）、纳米粒径跟踪分子（NTA）和marker WB鉴定。

翌科生物提供肿瘤、脑、肝、肺、胃、肾、淋巴、前列腺、心脏、神经、脂肪等组织外泌体提取服务

参考文献

CrescitelliR, et al. Isolation and characterization of extracellularvesicle subpopulations from tissues. Nature Protocols. 2021

流式检测外泌体蛋白定量

外泌体的检测技术主要包括电镜、WB和粒径分析；缺少精准、简便、快捷的外泌体定量方法。流式细胞术可以高速分析上万个颗粒，具有速度快、精度高、准确性好的优点，是当代最先进的细胞或微颗粒定量分析技术之一。随着科技的发展，新型流式细胞仪经过参数调试后可适用于检测低于100nm的微颗粒，极为适用于外泌体定量分析，且已经在多篇高水平论文中得以应用。

翌科生物拥有专利保护流式外泌体定量分析技术，是国内独家可提供外泌体流式定量服务的公司

技术原理

应用场景

参考文献

Nolan et al. Analysis of Individual Extracellular Vesicles by Flow Cytometry. Methods Mol Biol. 2018

Kamerkar et al. Exosomes facilitate therapeutic targeting of oncogenic KRAS in pancreatic cancer. Nature. 2017

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