专注于 外泌体与非编码RNA试剂研发 技术服务与临床转化
外泌体膜染料:PKH67、PKH26
PKH67(绿色荧光)或PKH26(红色荧光)外泌体染色试剂盒,采用专利外泌体膜标记技术可以稳定的与外泌体膜结构结合并发出绿色/红色荧光,细胞毒性较小,荧光背景低,脂溶性高。主要用于外泌体的体外和体内(in vivo)示踪,也可用于细胞膜染色。

产品效果

PKH26激发光与发射光图谱

PKH67激发光与发射光图谱


PKH26染色后外泌体与细胞共培

PKH67染色后外泌体与细胞共培

产品组成

方法一:外泌体直接染色

1. 适量(10ug,BCA法测量)外泌体溶于500ul Diluent C中(可以用DPBS代替);

2. 适量的PKH26(10ug外泌体推荐用量不超过1ul)染料溶于等体积的Diluent C中(可以用DPBS代替),温和吹打混匀;

3. 将步骤2中的溶液加入1中并迅速吹打混匀。

4. 避光,室温静置孵育5-10 min;

5. 加入等体积(2ml)的血清(exosome free),或者1%BSA终止染色反应;

6. 使用超滤/超离方式洗净未与外泌体结合的PKH26染料。


方法二:通过细胞染色间接对外泌体染色

1. 2×107细胞500g,5min离心,尽量弃去上清。

2. 加入1ml Diluent C,温和吹打混匀。

3. 将4ul PKH26储存液加入1ml Diluent C中(可以用DPBS代替),温和吹打混匀;

4. 将步骤2中制备的细胞悬液加入步骤3中的制备的PKH26工作液,快速吹打混匀后室温静置孵育5min;

5. 加入等体积(2ml)的血清(exosome free),或者1%BSA终止染色反应;

6. 使用超滤/超离方式洗净未与外泌体结合的PKH26染料。


注意:染色后的外泌体请立即使用或储存于-80℃


参考文献

Verweij et al. The power of imaging to understand extracellular vesicle biology in vivo. Nature Methods. 2021


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