产品效果
PKH26激发光与发射光图谱
PKH67激发光与发射光图谱
PKH26染色后外泌体与细胞共培
PKH67染色后外泌体与细胞共培
产品组成
方法一:外泌体直接染色
1. 适量(10ug,BCA法测量)外泌体溶于500ul Diluent C中(可以用DPBS代替);
2. 适量的PKH26(10ug外泌体推荐用量不超过1ul)染料溶于等体积的Diluent C中(可以用DPBS代替),温和吹打混匀;
3. 将步骤2中的溶液加入1中并迅速吹打混匀。
4. 避光,室温静置孵育5-10 min;
5. 加入等体积(2ml)的血清(exosome free),或者1%BSA终止染色反应;
6. 使用超滤/超离方式洗净未与外泌体结合的PKH26染料。
方法二:通过细胞染色间接对外泌体染色
1. 2×107细胞500g,5min离心,尽量弃去上清。
2. 加入1ml Diluent C,温和吹打混匀。
3. 将4ul PKH26储存液加入1ml Diluent C中(可以用DPBS代替),温和吹打混匀;
4. 将步骤2中制备的细胞悬液加入步骤3中的制备的PKH26工作液,快速吹打混匀后室温静置孵育5min;
5. 加入等体积(2ml)的血清(exosome free),或者1%BSA终止染色反应;
6. 使用超滤/超离方式洗净未与外泌体结合的PKH26染料。
注意:染色后的外泌体请立即使用或储存于-80℃
参考文献
Verweij et al. The power of imaging to understand extracellular vesicle biology in vivo. Nature Methods. 2021
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